三種消毒劑檢測方法分析對比

　　三種消毒劑檢測方法分析對比
　　對三種消毒劑檢測方法戊二醛溶液，二氯異氰尿酸鈉溶液系滅枯草桿菌黑色變種芽孢的效果進(jìn)行了比較。結(jié)果， 用歐洲標(biāo)準(zhǔn)懸液定量殺菌試驗(yàn)． 改良?xì)W洲懸液定量殺菌試驗(yàn)和載體浸泡定量殺菌試驗(yàn)檢測含戊二醛2％ (g／m1)溶液殺滅枯草桿菌黑色變種芽化達(dá)消毒合格標(biāo)準(zhǔn)， 作用時間分別為2.5．3.0，2.0 h。用前兩方法檢測含有效氯4 500 mg／L的二氯異氰尿酸鈉溶液及用載體方法檢測含有效氯l 000 mg／L該液殺滅枯草桿菌黑色變種芽孢達(dá)消毒合格標(biāo)準(zhǔn)，作用時間分別為30，20．10 min。當(dāng)染菌片的芽孢懸液中增含小牛血清50%(ml／m1)時， 用載體方法檢測含有效氯5 000 mg／L的二氯異氰尿酸鈉溶液殺滅該芽孢達(dá)消毒合格標(biāo)準(zhǔn)，作用時間近20 min， 與用歐洲標(biāo)準(zhǔn)懸液法檢測者（30 min)相近 表明三種方法檢測受有機(jī)物影響較小的戊二醛殺菌效果相差較小，檢測受有機(jī)物影響較大的二氯異氰尿酸鈉殺菌效果相差較大。后者可能與方法中含有機(jī)物多少有關(guān)。
　　消毒劑檢測方法
　　1、消毒劑檢測菌懸液與菌片的制備
　　在歐洲標(biāo)準(zhǔn)懸液法和改良?xì)W洲懸液法中， 用含胰蛋白胨0，1％ (g／m1) 和氯化鈉0，85％ (g／m1) 的去離子水溶液(pH6 8～7 0)， 將枯草桿菌黑色變種(ATCC9372）芽孢稀釋至規(guī)定含菌量的懸液。在載體法中， 用含蛋白胨0．1％ (g／m1)的磷酸鹽緩沖液(PBS， pH 7．2～7，4)制成的枯草桿菌黑色變種芽孢懸液滴染1，0 cm×1，0 cm 布片， 制成菌片。
　　2、消毒劑檢測中和劑選擇試驗(yàn)
　　因懸液法中和劑選擇試驗(yàn)結(jié)果可適用于載體試驗(yàn)中， 故試驗(yàn)用歐洲標(biāo)準(zhǔn)懸液法進(jìn)行。試驗(yàn)設(shè)6組， 第l組到第5組， 皆將0．5 ml含牛血清白蛋白(SIGMA公司產(chǎn)) 3％ (g／m1) 的去離子水溶液(過濾除菌后使用) 加入無菌試管中， 再加0，5 ml枯草桿菌黑色變種芽孢懸液， 混勻。然后， 第l、2組均加入4．0 ml消毒劑溶液(用標(biāo)準(zhǔn)硬水配制)， 作用至預(yù)定時間， 第l組吸取0，5 ml加到含有4．5 ml PBS的試管中， 第2組吸取0，5 ml加到含有4 5 ml中和劑溶液的試管中； 第3組加入4．0 ml中和劑溶液， 作用 預(yù)定時間， 吸取0、5 ml加到含有4，5 ml中和劑溶液的試管中； 第4組加入4．0 ml中和產(chǎn)物(1份消毒劑溶液加4份中和劑溶液， 中和作用l0 min) 溶液，作用至預(yù)定時間， 吸取0．5 ml加到含有4．5ml中和產(chǎn)物溶液的試管中： 第5組加入4．0ml PBS， 作用至預(yù)定時間， 吸取0．5 ml加到含有4．5 ml PBS的試管中。第6組為中和劑溶液、中和產(chǎn)物溶液和胰蛋白胨大豆蛋白胨培養(yǎng)基(TSA)陰性對照。試驗(yàn)結(jié)果，以第l組不長菌或長菌量遠(yuǎn)低于第2組， 第2組長菌量不低于l00 cfu／ml， 第3、4、5組長菌量達(dá)5．0×l0 ～5．0×l0。cfu／ml且組間菌數(shù)相差不超過l0％ ， 第6組不長菌， 為所選中和劑合適。
　　3、消毒劑檢測定量殺菌試驗(yàn)
　　歐洲標(biāo)準(zhǔn)懸液定量殺菌試驗(yàn) 向試管內(nèi)加入0．5 ml含牛血清白蛋白3％(g／m1) 的去離子水溶液和0．5 ml枯草桿菌黑色變種芽孢懸液， 混勻， 再加入4．0 ml消毒劑溶液(陽性對照組為無菌蒸餾水)，混勻并立即記時。作用至規(guī)定時間， 取0．5ml混懸液， 加于4．5 ml中和劑溶液中， 混勻。中和作用l0 min， 取0．5 ml該液或其稀釋液接種無菌平皿， 一式兩份。傾注l8～ 20 ml TSA 培養(yǎng)基， 混勻。置(37±1)℃培養(yǎng)72 h， 計數(shù)菌落數(shù)， 計算殺滅率。